微生物能明膠酶培養(yǎng)基樣品分析圖像顯微鏡
水解纖維素試驗
水生細菌有的具有分解纖維素的能力,通常認為,能在以纖維素作為
唯一碳源的培養(yǎng)基上生長的細菌必然含有纖維素酶,即能分解纖維素,
如纖維分解細菌等具有分解纖維素的能力。故而可利用此類細菌的這
種特性來鑒定它們。鑒定時以不含碳源的培養(yǎng)基為宜
明膠水解檢驗
明膠又名動物膠,是一種蛋白質(zhì)。某些微生物能分泌蛋白質(zhì)(胞外酶
)將明膠分解成小分子。這種分解酶稱為明膠酶。如果所鑒定的微生物
能產(chǎn)生明膠酶,則其態(tài)培養(yǎng)基就被液化為液態(tài)的培養(yǎng)基這種液化形態(tài)的
不同及液化能力的大小是判斷微生物的依據(jù)
明膠質(zhì)量不一,在培養(yǎng)基中的用量也難統(tǒng)般以20°C下凝固成穩(wěn)定的塊
狀為宜。夏天明膠不易凝固,則用量可適當娜多,冬天反之。為便于比
較,在同實驗室內(nèi)量好,用同牌號同一濃度的明膠。
接種培養(yǎng)
①用穿刺法以無菌操作技術(shù)將檢驗的微生物接種于試管明膠培養(yǎng)基
中,并做兩管不接種的作對照。
②將接種后的試管置于20°C下培養(yǎng)
⑧培養(yǎng)至2、7、10、14或30天時,及時在20°C下觀察微生物的生長
和明膠液化的狀況。如菌已生長,且明膠培養(yǎng)基凝塊在20°C下已部分
或全部變成可流動的液體,為明膠水解陽性。若菌已長出,而明膠表面
無凹陷為穩(wěn)定的凝塊,則為明膠水解陰性。如果有菌生長,菌苔下的明
膠表面也有凹陷,小窩(須與未接種的對照管比較,固明膠培養(yǎng)過久,水
分的蒸發(fā)也會產(chǎn)生凹陷)為輕度水解,按陽性記錄。如接種后不長菌,可
作為不在明膠培養(yǎng)基上生長或是此種成分培養(yǎng)基不適宜生長。
通常牛乳中含有蔗糖乳糖、蛋白質(zhì)酪素等成分。細菌對牛乳的利用主
要是指對乳糖及酪蛋白的分解利用。牛乳中加入石蕊作酸堿指示劑和
氧化及還原的指示劑。石蕊在中性環(huán)境中呈紫色,酸性中顯紅色,堿性
中呈現(xiàn)藍色,石蕊被還原時,則部分或全部脫色。細菌對牛乳作用有如
下六種情況
①產(chǎn)酸:細菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,使石蕊變紅色
②產(chǎn)堿:細菌分解酪蛋白產(chǎn)生堿性物質(zhì)使石蕊呈藍色胨化作用:細菌產(chǎn)
生蛋白酶,使酪蛋白分解,牛乳變得較清亮透明。胨化作用可在酸性也
可在堿性條件下進行。
④酸凝固作用:細菌發(fā)酵乳糖后產(chǎn)生許多酸,使石蕊牛乳變紅。當酸度
很高時,能使牛乳凝固,這稱為酸凝固”。
⑤凝乳酶凝固作用:有些細菌能分泌凝乳酶,使牛乳中的酪蛋白凝固。
這種凝作用在中性環(huán)境下發(fā)生。此類細菌通常還有水解蛋白的能力,故
會產(chǎn)生一些堿性物質(zhì),使石蕊變藍色,反之則不變色
⑥還原作用:細菌在培養(yǎng)基中生長旺盛時,使培養(yǎng)基的氧化還原電位降
低,因而石蕊褪色,上述五種情況下,石蕊均可被還原。
